一、实验目的和要求
　　《植物生物技术大实验》是植物科学与技术本科专业的一门专业课综合大实验。包含了基因工程、植物细胞工程、发酵原理与技术、酶制剂原理与技术等课程的实验教学内容。通过本实验课程的学习，使学生进一步加深对所学专业知识、专业理论、专业技能的理解、掌握和应用，为将来从事的科研、生产、推广等工作打下扎实的基础。
　　二、实验教学条件
　　完成本实验课程需要36学时，需要配备需要配备光学显微镜、解剖镜、恒温水浴锅、冰箱、电子天平、温箱、振荡器、灭菌锅、恒温箱、PCR仪、恒温摇床、离心机，电泳仪、电泳槽、凝胶成像仪、人工气候箱、高速冷冻离心机、微波炉、酸度计、旋风粉碎磨等器设备。由于本课程发展迅速，在教学过程中要不断更新实验内容，以适应学科发展需要。
　　三、实验主要教学内容

　　实验一  植物DNA的制备
　　(一)  实验意义和目的
　　通过实验学习和掌握植物总DNA提取和纯化的原理和方法，并为后续的实验准备DNA样品。
　　（二） 主要内容
　　以小麦幼苗为材料，通过液氮研磨和DNA提取液处理使细胞内的DNA、RNA和蛋白质释放，以RNase酶处理降解RNA，用苯酚、氯仿抽提蛋白质，异丙醇沉淀DNA，
70％乙醇清洗后溶解至TE备用。
　　（三）实验地点

　　实验二  基因工程(一)- 基因分离与凝胶电泳
　　(二)  实验意义和目的
　　通过实验学习和深入理解基因工程的技术流程, 学习利用PCR技术从植物基因组中分离基因的方法及凝胶电泳技术。
　　（二） 主要内容
　　1. 分离基因
　　2. 凝胶电泳
　　（三）实验地点
　　分子生物学实验室

　　实验三  基因工程(二)- 基因片段与载体连接
　　(一)  实验意义和目的
　　通过实验学习和深入理解基因工程的技术流程, 学习利用T－载体对PCR产物进行连接构建表达载体的方法。
　　（二） 主要内容
　　基因片段与载体连接
　　（三）实验地点
　　分子生物学实验室

　　实验四  基因工程(三)- 大肠杆菌的感受态细胞制备与转化
　　(一) 实验意义和目的
　　通过实验学习和深入理解基因工程的技术流程,学习利用热激法进行大肠杆菌的遗传转化。
　　（二） 主要内容
　　大肠杆菌的感受态细胞制备与转化
　　（三）实验地点
　　分子生物学实验室

　　实验五  基因工程(四)- 培养基与平板制备及转化细胞的筛选培养
　　(一) 实验意义和目的
　　通过实验学习和深入理解基因工程的技术流程, 学习培养基与平板制备,转化后细胞的培养与转化子筛选。
　　（二）主要内容
　　1. 培养基与平板制备
　　2. 转化细胞的筛选培养
　　（三）实验地点
　　分子生物学实验室

　　实验六  基因工程(五)- 转化细胞的鉴定 
　　(一)实验意义和目的
　　通过实验学习和深入理解基因工程的技术流程,学习转化子鉴定的方法。
　　（二）主要内容
　　转化细胞的鉴定
　　（三）实验地点
　　分子生物学实验室

　　实验七  植物组织培养培养基的制备
　　(一) 实验意义和目的
　　学习掌握不同类型培养基的成分及配制,为其它的实验作准备。
　　(二) 主要内容
　　1. 培养基母液的制备
　　2. 培养基的制备
　　(三) 实验地点
　　生物技术实验室
　　实验八  植物的茎尖微繁殖
　　(一) 实验意义和目的
　　掌握不同类型植物茎尖的分离与灭菌技术,掌握植物茎尖培养技术。
　　(二)主要内容
　　1. 植物茎尖的分离与灭菌
　　2. 植物茎尖的接种与培养
　　(三)实验地点
　　生物技术实验室

　　实验九  小麦花药培养
　　(一) 实验意义和目的
　　掌握小麦花药的分离与灭菌方法,掌握小麦花药的接种与培养方法。
　　(二)主要内容
　　1. 小麦花药的分离与灭菌
　　2. 小麦花粉细胞的培养
　　(三)实验地点
　　生物技术实验室

　　实验十  小麦的幼胚培养
　　(一) 实验意义和目的
　　掌握小麦幼胚的剥离与灭菌方法,掌握小麦幼胚组织的培养方法。
　　(二)主要内容
　　1. 小麦幼胚的分离与灭菌
　　2. 小麦幼胚组织的培养
　　(三)实验地点
　　生物技术实验室

　　实验十一  酵母菌的分离与纯化
　　(一) 实验意义和目的
　　掌握酵母菌分离与纯化方法。
　　(二)主要内容
　　分离与纯化酵母菌
　　(三)实验地点
　　生物技术实验室

　　实验十二  种子扩大培养
　　(一) 实验意义和目的
　　通过本实验掌握种子扩大培养的方法。
　　(二)主要内容
　　扩大培养种子
　　(三)实验地点
　　生物技术实验室

　　实验十三  植物发酵调味品的感官检验
　　(一) 实验意义和目的
　　学习植物发酵调味品的感官检验方法。
　　(二)主要内容
　　感官检验常见发酵调味品
　　(三)实验地点
　　生物技术实验室

　　四、 考核方法
　　课堂对学生动手能力、实验完成情况、学生出勤情况等进行考察，学生撰写完成实验报告后，对实验报告评定成绩；对以上四项分别按20%，30%，10%和40%的比例评定最终实验成绩。
　　五、学时分配及建议

序号	实验项目	学时
实验一	植物DNA的制备	3
实验二	基因工程(一)- 基因分离与凝胶电泳	4
实验三	基因工程(二)- 基因片段与载体连接	4
实验四	基因工程(三)- 大肠杆菌的感受态细胞制备与转化	4
实验五	基因工程(四)- 培养基与平板制备及转化细胞的筛选培养	3
实验六	基因工程(五)- 转化细胞的鉴定	3
实验七	植物组织培养培养基的制备	3
实验八	植物的茎尖微繁殖	2
实验九	小麦花药培养	2
实验十	小麦的幼胚培养	2
实验十一	酵母菌的分离与纯化	2
实验十二	种子扩大培养	2
实验十三	植物发酵调味品的感官检验	2

　　六、说明
　　本实验教学大纲适用于植物科学与技术专业的植物生物技术大实验.